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gb4789.3-2016大肠菌群平板计数法细节解读

培训费用:¥1

  • 授课地点:上海\上海
  • 课程分类:资格认证
  • 培训天数:2天
  • 开班时间:2024年12月28日至2054年12月29日 (正在报名中)
  • 浏览次数:3628 次
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【课程大纲】

gb4789.3-2016大肠菌群平板计数法细节解读-圣问技术职业技能培训中心v:stspx134
一、无需高压灭菌的vrba培养基配制使用问题

1.所用器皿是否需要灭菌?

答:不需要。配制培养基所用到的锥形瓶、玻璃棒、勺子等均不需要灭菌,但要求一定要清洗干净,表面无污渍、无残留,且晾干无水渍。煮沸完成后,取下锥形瓶,用一般用锡箔纸覆盖瓶口,用橡皮筋缠绕,待冷却至适宜温度即可倾注培养基。在倾注培养基时,须点燃酒精灯,稍微灼烧锥形瓶口。

2.如何保持培养基"煮沸2min"?

答:培养基加热煮沸至完全溶解一般采用电陶炉或电热炉进行,但培养基很难保持煮沸2min,一旦煮沸,则培养基很快上涌、翻腾,若不调低温度或立刻采取其他措施,则培养基可在数秒内喷涌出来,严重者可喷涌2米以上、电磁炉周围1—2米范围内都是培养基飞溅的范围(实验室危险因子之一)。因此,要做到"煮沸2min",则需在该培养基即将煮沸时调低温度,待培养基一沸腾就马上移离热源,待培养基停止沸腾后,又继续加热至沸腾状态又移开,这样间歇性煮沸2min。(注意规范操作,做好防烫措施,避免烫伤)

3.若培养基未用完,是否可以冷藏起来下次用?

答:不可以。4789.28中已规定,固体培养基最多允许熔融1次(指的是经过高压灭菌冷却后的培养基还可以熔融一次后使用)。且vrba培养基冷却后,再次熔融时非常容易喷涌,若温度控制不当,底部培养基熔融后很快就会发生喷涌。

4.倾注完成后是否需要"覆盖一层"?如何覆盖?

答:需要覆盖。因为培养基冷却后在表面容易形成一些冷凝水,菌落容易蔓延开,所以在倾注完成后,再覆盖一层培养基,则菌落不容易接触到水,这样不易形成蔓延菌落。在检验中最好都进行覆盖,最好是在原培养基已凝固或半凝固(不会发生晃动)时再倾注一层培养基("一层"是指缓慢倾注培养基至培养基刚好能够覆盖整个平皿)。

二、如何确定培养基上长的是不是大肠菌群?

答:不要去管什么是大肠菌群的典型形态,建议新手们认真按照标准进行证实试验,此证实试验非常简单,每一次vrba上有菌落生长都进行证实试验,如此往复3-4次,对于哪种形态才是大肠菌群已经能够了然于心了。建议平时多配一些bglb肉汤管冷藏储存备用,需要进行证实试验时分分钟可以完成试验。

三、两个梯度都长了菌,如何选取?如何进行证实试验?菌落选取数量?

答:选取15-150cfu之间的平板(指的是vrba平板上所有菌落数在此范围),挑取可疑菌落进行证实试验。详细举例说明:若有两个连续梯度的4个平板上菌落数均在15-150之间,则4个平板上的菌落都要挑取进行证实试验,实际操作时,可灵活操作,如:1:10的两个平板上的菌落数分别为120、123,1:100的两个平板的菌落数分别为16、18,严格来讲必须至少在每个平板上分别挑取5个可疑菌落、5个典型菌落进行证实试验。建议使用镍合金接种环(即传统的接种环,而不是一次性塑料接种环),因为vrba上生长的菌落(无论典型或可疑)大部分长在底层、且菌落一般较大,被培养基覆盖,传统的接种环较细,用以刮去上层培养基较方便,挑取菌落也较方便。

确证试验注意:1).每种可疑菌落挑取5个,每个菌落放入1管gblb管中;2)"产气者,记为大肠菌群阳性管",就要求在实验前须认真筛选bglb管,凡小导管中有气泡的gblb管应先排去导管中的气泡再使用。

bglb确证阳性结果

四、结果如何计算?

答:首先,在vrba培养24h后进行计数,分别计数可疑大肠菌群和典型大肠菌群的数量。例:10-4样品稀释液1ml,在vrba平板上有100个典型和可疑菌落,挑取其中10个接种bglb肉汤管,证实有6个阳性管,则该样品的大肠菌群数为:100x6/10x104/g(ml)=6.0x105 cfu/g(ml)。若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数计算。

五、若所选适合计数梯度平板上可疑和典型菌落,最终证实全部为阴性,结果如何计算?

答:根据第3条,选取适宜菌落数的平板挑取菌落进行证实试验,若证实全部为阴性,则需要再挑取更低稀释度的平板上的菌落(建议可疑和典型菌落分别挑取10个)进行证实试验,若第二次证实试验均呈阴性,以<1乘以最低稀释度进行计算,如:1:10的平板菌落数分别为120、123,1:100的平板上菌落数分别为16、18,首先挑取1:100的两个平板上的菌落进行证实试验,若全部为阴性,再挑取1:10的两个平板上的菌落进行证实试验,若1:10的平板上的菌落数证实为阴性,则最终计算过程为<1x10,最终结果为<10;若1:10的的平板上的菌落有阳性管,则按照第5条进行计算。



【讲师介绍】

张老师qq134 8799 257 手机 微信134 1208 6256、李老师、范老师、朱老师、许老师、陈老师、文老师、鲁老师、黄老师、林老师、王老师、崔老师、伍老师等:专业师资、计量认证权威机构、技能培训专业机构、技术服务称心机构--广州圣问技术服务有限公司--圣问技术认证服务中心--stspx134,你满意的pg电子竞技平台的合作伙伴。

一、食品检验员培训对象:

  企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、食品卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员;单位中从事从事农副产品生产加工、粮油及制品、餐饮、糕点糖果、乳及乳制品、白酒果酒黄酒、啤酒、饮料、罐头、肉类及制品、调味品酱货腌制品、茶叶、食品及食品内包装材料、容器、洗涤剂、消毒剂和用以食品生产经营的工具、设备的生产经营岗位,用抽样检查方式对各类食品的成分、添加剂、农残、及卫生、毒性、微生物等指标进行测试检验的人员;各类食品、化学专业院校的在校学生。

  二、食品化验员培训内容:

  按照国家标准大纲制定的要求对食品检验初级、中级、高级技术人员必须掌握的基础知识和专业知识,检验技术及检验操作技能,食品行业的基本的法律法规等主要内容包括:

  食品检验的感官检验技术 食品检验的化学基础 实际操作技能培训食品专业分析与检验技术 化学分析与检验技术 仪器分析与检验技术食品检验的微生物检验技术 误差分析与数据处理 食品检验概述

  三、食品检验工培训目的:

  通过学习使学员检验水平能达到国家职业技能鉴定大纲要求,掌握基本的理论和专业知识,按着国家劳动和社会保障部规定的食品检验初级、中级、高级职业资格要求,取得相应级别的职业资格证书,并能持证独立上岗操作。

  参考文件

  《中华人民共和国食品安全法》

  《中华人民共和国食品安全法实施条例》

  《中华人民共和国认可条例》

  《食品检验机构资质认定管理办法》

  《实验室资质认定评审准则》

  《食品检验机构资质认定条件》

  随时可报名(具体地点留意通知函信息指引,;包括从事粮油及制品、糕点糖果、乳及乳制品、白酒果酒黄酒、啤酒、饮料、罐头、肉蛋及制品、调味品酱货腌制品、茶叶、食品添加剂及食品内包装材料等岗位,用抽样检查方式对各类食品的成分及卫生、毒性等指标进行测试检验的人员。

  从事的工作主要包括:(1)采集样品;(2)配制标准溶液;(3)使用培养箱、显微镜等仪器设备检验样品的微生物含量;(4)检验样品的微量金属元素、微量非金属元素及理化指标(5)记录、计算、判定检验数据;(6)协助主检人员完成检验报告;(7)检查、维护仪器设备;(8)负责检验室卫生、安全工作。



【培训对象】

广州、上海、北京、天津、重庆、深圳、南京、杭州、福州、济南、合肥、郑州、西安化学检验员职业资格证书报考条件?宜宾、泸州、乐山、雅安、广元、达州、南充、绵阳、汶川、攀枝花、成都、遵义、三穗、毕节、都匀、贵阳、南宁、曲靖、保山、大理、思茅、香格里拉、石林、开远、昆明、三亚、海口、衡阳、邵阳、永州、郴州、岳阳、株洲、湘潭、怀化、常德、张家界、长沙化验员证书考试地址?承德、唐山、秦皇岛、沧州、石家庄、沈阳、西宁、太原、呼和浩特、大连、青岛、宁波、厦门、苏州、南通、无锡、泰州、镇江、扬州、盐城、徐州、淮安、连云港、常州化学检验工资格证书报考条件?宜芜湖、安庆、蚌埠、亳州、黄山、温州、嘉兴、绍兴、湖州、金华、衢州、丽水、舟山、台州、漳州、宁德、莆田、南平、三明、龙岩、泉州、微生物检验员考试地址?昌、荆州、襄樊、十堰、恩施、武汉、新干、萍乡、景德镇、鹰潭、泰和、瑞金、赣州、九江、南昌、邯郸、保定、张家口、潍坊、烟台、威海、日照、临沂、济宁、菏泽、滨州、德州、淄博、洛阳、新乡、许昌、漯河、平顶山、信阳、周口、驻马店、南阳、三门峡、济源、焦作、安阳、开封化学检验员考试时间?东莞、中山、珠海、清远、汕头、汕尾、潮州、揭阳、河源、梅州、茂名、云浮、湛江、惠州、江门、肇庆、柳州、防城港、北海、贺州、桂林、钦州、梧州、玉林化妆品化验员培训地址?】等各地均有开办)





更新时间:2022/11/9 22:02:34

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